4-1 多克隆抗體制備服務流程
| 動物免疫（宿主動物可提供兔、羊、雞、小鼠） | ||
| 設計實驗方案 | 客戶有特殊要求，需提供詳細的實驗要求 | 2-3工作日 |
| 免疫實驗動物 | 分三到四次免疫，Elisa檢測即時效價 | 6-12周 |
| 微測Elisa檢測 | 以免疫原為抗原樣品，保證Elisa檢測效價1：10000以上 | 1周 |
| 客戶檢測 | 自行設計檢測方案 | 1周 |
| 合格，抗體及技術(shù)服務報告交付客戶；不合格服務停止 | ||
4-2單克隆抗體制備服務流程
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第一階段：免疫小鼠
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設計實驗方案
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客戶有特殊要求，需提供詳細的實驗要求
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2個工作日
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免疫實驗動物
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5只6-8周齡BALB/C小鼠，Elisa檢測即時效價
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7-8周
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Elisa檢測
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以免疫原為抗原樣品，保證Elisa檢測效價1:10000以內(nèi)
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1周
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第二階段：單克隆雜交瘤細胞株的建立
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細胞融合
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取小鼠的脾細胞與骨髓細胞融合，篩選陽性克隆
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克隆擴增和初選
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擴增并低溫保存一個成功融合的產(chǎn)物
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亞克隆
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有限稀釋法亞克隆至行成穩(wěn)定的單克隆融合細胞株
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抗體鑒定（依據(jù)訂單要求）
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測定上清抗體亞型、特異性、抗體中和反應性及抗體配對參數(shù)
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腹水制備/轉(zhuǎn)瓶培養(yǎng)
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根據(jù)客戶要求，提供不同種類服務
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抗體純化
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利用Protein A親和純化
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第三階段：單克隆雜交瘤細胞株的驗收
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提供的雜交瘤培養(yǎng)物的腹水（或上清液）與顧客方提供的抗原樣品有特異性結(jié)核，同時抗抗體抗異性只針對客戶放提供的抗原樣品做出保證
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第四階段：單克隆抗體雜交瘤細胞株的交付
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2-3株雜交瘤細胞株和少量腹水（或上清液），需要純化的訂單會依據(jù)訂單要求提供純化后抗體，并給出相應的鑒定報告（包括單抗的亞型）
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抗原親和純化
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使用抗原偶聯(lián)Sepharose 4B制備抗原親和純化層析柱，僅捕獲針對抗原的特異性抗體，純化得到的抗體產(chǎn)物純度高到90%以上，特異性強、靈敏度高，能明顯減低背景信噪干擾，是抗體純化中最佳的實驗方法之一 |
1-2周
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Protein A/G純化
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特異性的捕獲樣品中國的IgG，性價比較高，特別適用于大規(guī)模樣品的純化 |
1-2周
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飽和硫酸銨沉淀法純化
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分離所有的免疫球蛋白，得率最高，但特異性和靈敏度偏低，僅適用于定性分析 |
1周
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