乙肝表面抗原（HBsAg），是乙肝病毒的外殼蛋白，在乙肝病毒感染早期出現(xiàn)于病人血循環(huán)中，可持續(xù)數(shù)月，數(shù)年乃至終身，是乙肝病毒感染的標(biāo)志。因此，HBsAg檢測(cè)常用于臨床乙肝病毒感染診斷和治療評(píng)價(jià)，以及無(wú)償獻(xiàn)血血源篩查中。
人乙型肝炎病毒（HBV）的外膜由3種表面抗原蛋白構(gòu)成，其C端序列相同，其中主蛋白（S）（也稱小分子蛋白）是一個(gè)由226個(gè)氨基酸組成的多肽，中蛋白（M）是在S蛋白的N-端加了55個(gè)氨基酸（也稱前S2區(qū)），大蛋白（L） 是依據(jù)病毒亞型在M蛋白的N-端再加了108或119個(gè)氨基酸（也稱前S1區(qū)）。主蛋白S是人乙型肝炎病毒的主要組成成分，結(jié)構(gòu)和功能研究結(jié)果表明，S蛋白疏水區(qū)域（殘基99-169）參與抗HBsAg抗體的結(jié)合。
對(duì)HBsAg檢測(cè)的關(guān)鍵核心技術(shù)在于獲得一對(duì)活性效價(jià)高，親和力強(qiáng)，抗原結(jié)合位點(diǎn)不存在空間結(jié)構(gòu)干擾的單克隆抗體。由于HBsAg是一個(gè)表面結(jié)構(gòu)復(fù)雜的多肽，制備滿足上述條件的抗HBsAg 單克隆抗體技術(shù)難度較大。本公司研發(fā)團(tuán)隊(duì)從 HBsAg 優(yōu)勢(shì)抗原結(jié)構(gòu)優(yōu)化修飾著手，采用酵母表達(dá)了HBsAg 抗原蛋白，并以此抗原免疫小鼠，經(jīng)過(guò)多年的不斷融合、篩選，從幾百個(gè)單克隆雜交瘤細(xì)胞株中成功篩選出2株配對(duì)良好的 HBsAg 單克隆抗體雜交瘤細(xì)胞株。用其制備的金標(biāo)檢測(cè)試劑產(chǎn)品對(duì)兩百多份臨床乙肝患者血清樣本進(jìn)行性能評(píng)價(jià)，同時(shí)用進(jìn)口羅氏HBsAg 化學(xué)發(fā)光定量檢測(cè)試劑盒進(jìn)行平行對(duì)比實(shí)驗(yàn)。

• 稀釋線性

用自制的鼠源抗血紅蛋白單抗（7A8）進(jìn)行膠體金標(biāo)記，用自制的的另一株鼠源血紅蛋白單抗（6B9）包被硝酸纖維素膜，按“雙抗體夾心”金標(biāo)免疫層析檢測(cè)試劑產(chǎn)品的制備工藝并進(jìn)行陰陽(yáng)符合率、穩(wěn)定性及CV值檢測(cè)。結(jié)果顯示：自制HBsAg金標(biāo)檢測(cè)試紙條的檢測(cè)靈敏度均可達(dá)到2.5 ng/mL，而且在25 μg/mL-2.5 ng/mL濃度范圍內(nèi)有較好的線性關(guān)系（R2 = 0.999），可定量檢測(cè)。

• 臨床比對(duì)

自制HBsAg金標(biāo)檢測(cè)試紙條對(duì)264份乙肝患者陽(yáng)性血清檢測(cè)陽(yáng)性率為87.5%，與HBsAg化學(xué)發(fā)光法定量檢測(cè)盒檢測(cè)陽(yáng)性率一致（87.5%），高于同類試劑A（86.7%）和B（86.7%）0.8個(gè)百分點(diǎn)，結(jié)果見(jiàn)表1和圖1。

表1：乙型肝炎患者陽(yáng)性血清檢測(cè)結(jié)果					自制試劑及對(duì)比試劑對(duì)乙肝患者陽(yáng)性血清檢測(cè)陽(yáng)性率
項(xiàng)目	自制試劑	化學(xué)發(fā)光	金標(biāo)試劑A	金標(biāo)試劑B
	-264	-264	-264	-264
陽(yáng)性數(shù)	231	231	229	229
陰性數(shù)	33	33	35	35
陽(yáng)性率	87.50%	87.50%	86.70%	86.70%

參考文獻(xiàn)：
[1] 乙型肝炎病毒的傳播