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    抗體定制

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    4-1 多克隆抗體制備服務流程

    動物免疫(宿主動物可提供兔、羊、雞、小鼠)
    設計實驗方案 客戶有特殊要求,需提供詳細的實驗要求 2-3工作日
    免疫實驗動物 分三到四次免疫,Elisa檢測即時效價 6-12周
    微測Elisa檢測 以免疫原為抗原樣品,保證Elisa檢測效價1:10000以上 1周
    客戶檢測 自行設計檢測方案 1周
    合格,抗體及技術服務報告交付客戶;不合格服務停止

    4-2單克隆抗體制備服務流程

    第一階段:免疫小鼠
    設計實驗方案
    客戶有特殊要求,需提供詳細的實驗要求
    2個工作日
    免疫實驗動物
    5只6-8周齡BALB/C小鼠,Elisa檢測即時效價
    7-8周
    Elisa檢測
    以免疫原為抗原樣品,保證Elisa檢測效價1:10000以內
    1周
    第二階段:單克隆雜交瘤細胞株的建立
    細胞融合
    取小鼠的脾細胞與骨髓細胞融合,篩選陽性克隆
     
    克隆擴增和初選
    擴增并低溫保存一個成功融合的產物
     
    亞克隆
    有限稀釋法亞克隆至行成穩定的單克隆融合細胞株
     
    抗體鑒定(依據訂單要求)
    測定上清抗體亞型、特異性、抗體中和反應性及抗體配對參數
     
    腹水制備/轉瓶培養
    根據客戶要求,提供不同種類服務
     
    抗體純化
    利用Protein A親和純化
     
    第三階段:單克隆雜交瘤細胞株的驗收
    提供的雜交瘤培養物的腹水(或上清液)與顧客方提供的抗原樣品有特異性結核,同時抗抗體抗異性只針對客戶放提供的抗原樣品做出保證
    第四階段:單克隆抗體雜交瘤細胞株的交付
    2-3株雜交瘤細胞株和少量腹水(或上清液),需要純化的訂單會依據訂單要求提供純化后抗體,并給出相應的鑒定報告(包括單抗的亞型)

    4-3 抗體純化服務流程
    抗原親和純化
    使用抗原偶聯Sepharose 4B制備抗原親和純化層析柱,僅捕獲針對抗原的特異性抗體,純化得到的抗體產物純度高到90%以上,特異性強、靈敏度高,能明顯減低背景信噪干擾,是抗體純化中最佳的實驗方法之一
    1-2周
    Protein A/G純化
    特異性的捕獲樣品中國的IgG,性價比較高,特別適用于大規模樣品的純化
    1-2周
    飽和硫酸銨沉淀法純化
    分離所有的免疫球蛋白,得率最高,但特異性和靈敏度偏低,僅適用于定性分析
    1周
     

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